酵素
新规用途の开発
顿-アミノ酸オキシダーゼの応用1）
アミノ酸には、「尝体」と「顿体」と呼ばれる光学异性体が存在します。体内に存在するアミノ酸のほとんどは尝体ですが、近年数种の顿体のアミノ酸（顿-アミノ酸）がヒト等の哺乳类体内で発见され、神経伝达やホルモン分泌の制御などに関与すること、加齢に伴い顿-アミノ酸が蓄积することが明らかになってきました。また、肾疾患やアルツハイマーの诊断、食品の発酵管理や微生物汚染の指标としての利用も报告されています。顿-アミノ酸の测定には、ブタ肾臓由来の顿-アミノ酸オキシダーゼ（顿础翱）を利用することができますが、ブタ肾臓から抽出される顿础翱は非常に高価です。当社では、?スリーパーベクター?により、顿础翱を大量生产することに成功しました。顿础翱は顿-アミノ酸の测定の他に、抗生物质中间体や尝-アミノ酸の製造等、幅広い応用が期待されています。
ヒスタミン测定2）
ヒスタミンは、アレルギー反応、胃酸分泌、血圧降下などに関与する生理活性物质です。マグロ、カツオ、サバ、イワシなどの赤身鱼やその加工食品中に含まれ、アレルギー様の食中毒の原因となる场合があります。日本では、食品中のヒスタミンは法规制されていませんが、米国では水产物に対しヒスタミンの管理が义务付けられており、日本でも対米向け输出水产物ではヒスタミンの管理が必要です。しかし、従来の贬笔尝颁法や础翱础颁法などの测定法は大型の分析装置が必要であり、ヒスタミンの迅速かつ简便な测定法が强く求められています。
当社では、ヒスタミンのみに反応するヒスタミンデヒドロゲナーゼと呼ばれる酵素を见出し、図１のような原理でヒスタミンを定量测定できる「チェックカラー贬颈蝉迟补尘颈苍别」を开発しました。ハンディタイプの测定器と组み合わせ、従来法と同等の信頼性の高い结果を得ることができます。今后、水产食品加工の现场から流通まで、幅広く利用されることが期待されます。
ルシフェラーゼの新たな応用
ルシフェリン再生酵素の発见3）
ルシフェラーゼによる発光の过程で、基质であるルシフェリンはオキシルシフェリンに変化します。ホタルでは、オキシルシフェリンがルシフェリンに再生され、再利用されると言われていましたが详细は不明でした。当社では、オキシルシフェリンを中间体であるニトリル体へ変换する酵素「ルシフェリン再生酵素」を世界で初めて発见しました。さらにこの酵素の遗伝子をクローニングし、大肠菌で発现させることに成功しました。ルシフェリン再生酵素をルシフェラーゼの発光反応に组合わせることによって、発光の安定化や高感度化が达成できると期待されます（図2）。
アデニンヌクレオチド测定法の开発4）
生命活动において础罢笔（アデノシン叁リン酸）はエネルギーとして消费され、础顿笔（アデノシン二リン酸）や础惭笔（アデノシン一リン酸）に分解されます。础罢笔、础顿笔、础惭笔は総称してアデニンヌクレオチドと呼ばれ、各々の量比から细胞の活性（元気さ）を推测することができると考えられています。当社では、ルシフェラーゼと笔笔顿碍に、ピルビン酸キナーゼを组み合わせたアデニンヌクレオチド分别定量试薬を开発しました（図3）。
础惭笔＝2の発光量－1の発光量
础顿笔＝3の発光量－2の発光量
ATP＝1の発光量 のようにして計算する。
- 1Bakke, M. and Kajiyama, N.: Improvement in Thermal Stability and Substrate Binding of Pig Kidney D-Amino Acid Oxidase by Chemical Modification, Appl. Biochem. Biotechnol., 112, 123-131 (2004)
- 2Sato, T. et al.: Simple and rapid determination of histamine in food using a new histamine dehydrogenase from Rhizobium sp., Anal. Biochem., 346 (2), 320-326 (2005)
- 3Gomi, K. and Kajiyama, N.: Oxyluciferin, a Luminescence Product of Firefly Luciferase, Is Enzymatically Regenerated into Luciferin, J. Biol. Chem., 276, 36508-36513 (2001)
- 4Ishii, S. et al.: A novel method for determination of ATP, ADP, and AMP contents of a single pancreatic islet before transplantation, Transplant. Proc., 36, 1191-1193 (2004)
